艰难梭菌是革兰阳性厌氧产芽孢杆菌,其孢子在环境中可存活数月乃至更长的时间,是医院内感染和抗生素相关性腹泻最常见病原菌之一。艰难梭菌主要通过粪-口途径传播,大多数产毒株因产生毒素A(肠毒素)和毒素B(细胞毒素)而致病,两种毒素分别由两个独立的基因tcdA和tcdB编码。毒素A导致消化道内液体分泌增加、黏膜炎症和结构损坏。毒素B通过干扰蛋白质的活性,调节肌动蛋白聚合,从而导致细胞骨架破坏,其毒力在胃肠道内的浓度几乎是毒素A的10倍,是导致感染的主要原因。一般情况下,艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection, CDI)患者的恶化程度会因毒素量的增加而加重。
近年,CDI在发病率、严重程度和复发率都呈不断上升的趋势,2013年美国已将艰难梭菌与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌感染作为三大医院获得性感染的主要病原菌。在免疫力低下、住院时间长、抗菌药物使用强度大的肿瘤病人中,CDI尤其应受到重视。CDI的临床表现呈现多样性,从轻、中度腹泻到暴发性甚至致命性伪膜性结肠炎、中毒性巨结肠、肠穿孔、败血症。严重感染者须行肠切除,甚至死亡。
CDI的诊断须结合临床和实验室检查,患者存在腹泻症状,且24h内腹泻3次或3次以上,并满足以下任一条件:(1)粪检出产毒性艰难梭菌或毒素阳性;(2)结肠镜或组织病理学示伪膜性结肠炎。
为了给临床诊断艰难梭菌感染提供更加准确的依据,便于及时治疗,医学检验科于近期开展了粪便标本艰难梭菌毒素检测,样本随到随检,2h内报告。
检测原理:
通过酶联免疫层析法检测艰难梭菌抗原和毒素。试剂盒在单一反应孔中使用特异性抗体同时检测疑似感染艰难梭菌病人粪便中艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原和毒素,前者作为艰难梭菌的筛选试验,后者检测是否存在毒素A和毒素B证实存在艰难梭菌有毒株。
标本采集及要求:
(1)标本:粪便
(2)量:固体便>2g(蚕豆大小);水样便>1ml。
(3)容器:普通粪便标本盒
(4)送检时间和要求:新鲜粪便,1小时之内送检。
检验结果及解释:
谷氨酸脱氢酶(GDH):阴性 未检测到艰难梭菌
谷氨酸脱氢酶(GDH):阳性 艰难梭菌毒素A&B:阴性 检测到艰难梭菌但未检测到毒素
谷氨酸脱氢酶(GDH):阳性 艰难梭菌毒素A&B:阳性 检测到产AB毒素的艰难梭菌